農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀溶解酶為何出現(xiàn)酶活性低現(xiàn)象

農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)系。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的存在。

一、溶解酶為何出現(xiàn)酶活性低現(xiàn)象?

　　1）運(yùn)輸過(guò)程中酶已失活;

　　2）沒(méi)有充分搖勻;

　　3）配制過(guò)程中試劑、蒸餾水、移液管被污染或沒(méi)有洗凈;

　　4）操作不當(dāng)，導(dǎo)致酶失活;

　　5）培養(yǎng)時(shí)間較短;

　　6）培養(yǎng)溫度較低;

　　7）配置好的試劑保存溫度過(guò)高，使酶失活

二、食品安全測(cè)試過(guò)程中需要注意哪些問(wèn)題?

        1）在檢測(cè)過(guò)程中反應(yīng)瓶、微量移液器、移液管等要洗干凈;特別是用完后立即清洗，放在無(wú)污染的地方晾干（如濾紙上、移液管架上等）;

        2）不同試劑使用不同的器具，堅(jiān)持器具專(zhuān)用，并貼上專(zhuān)用標(biāo)簽;

        3）酶、顯色劑、底物的加入量要準(zhǔn)確，加后要搖勻;

        4）用手抓比色皿的磨砂面，放進(jìn)儀器比色槽時(shí)，應(yīng)將透光面對(duì)應(yīng)光路方向，讓光路通過(guò)比色皿的透光面;

        5）操作要盡量快。因?yàn)槊敢种坡蕶z測(cè)的關(guān)鍵就是抑制率與反應(yīng)時(shí)間的關(guān)系，對(duì)照測(cè)量和樣品測(cè)量操作時(shí)間不一致，也會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確;

        6）加入酶試劑以前一定要把培養(yǎng)池溫度加熱到37℃，以保證加完酶液和顯色劑后能立即把反映瓶放入培養(yǎng)池，切記不能加完試劑后再等升溫;

        7）在使用移液槍吸取溶液時(shí)，按壓要適度，切忌一下按到底，并且吸頭要及時(shí)清洗。

 三、農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀其他注意事項(xiàng)

        1.磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水，否則影響準(zhǔn)確性。

        2.酶試劑及底物要在0～5℃溫度條件下保存，以確保酶的活性，因此，應(yīng)在冰箱中保存，但不能凍至結(jié)冰。

        3.試劑從試劑瓶吸出后，不能再放回瓶中，堅(jiān)持只吸不進(jìn)的原則，防止試劑污染。

        4.樣品測(cè)試的*后一道程序，即加底物后，應(yīng)馬上搖勻，放入測(cè)定儀，否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。經(jīng)實(shí)踐，在菠菜樣品的測(cè)試中，立刻放入的抑制率為21.4%，1分鐘后放入的51.7%，可見(jiàn)，加試劑后放入時(shí)間的長(zhǎng)短可影響其準(zhǔn)確性。

        5.韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。因此.，處理這類(lèi)樣品時(shí)，可采取整株蔬菜浸出提取液的方法（不要搞爛樣品）。對(duì)葉綠素含量較高的蔬菜，也可采取類(lèi)似方法。

        6.生化檢測(cè)法只是定性檢測(cè)法，只能檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留，不適用于其它類(lèi)型農(nóng)藥的檢測(cè)。